简介

本实验介绍沉淀 σ32 和 RNA 聚合酶需聚乙烯亚胺的含量。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。

操作方法

沉淀 σ32 和 RNA 聚合酶实验

材料与仪器

聚乙烯亚胺
SDS-PAGE 电泳装置 聚丙烯酰胺小胶

步骤

材料与设备

SDS-PAGE 电泳装置

聚丙烯酰胺小胶（10%)

试剂

聚乙烯亚胺（PEI)(6% 储液，pH7.9)

(配方，见“试剂的配制”，pp.184~189)

操作程序

1)0.2%DOC 上清 (见 p.153), 取 6x50-ul 等分试样。各试样分别加入 0、1、2、3、4 和 5ul 6%PEI 储液（使 PEI 浓度分别为 0%、0.12%,0.24%、0.36%、0.48% 和 0,6%), 充分混匀，孵育 5~10 min。

2) 用微型离心机离心 1ml，离下沉淀物。如需要，取上清样品，供快速蛋白质斑点印迹试验（见 PP.172?173) 或 SDS 凝胶电泳分析用。做斑点印迹试验应立即进行。

结果

典型的显示 PEI 滴定实验结果的 SDS 凝胶照片，见图 3-5。