蛋白质的等电点测定实验

简介

蛋白质的等电点是蛋白质的重要特性之一。测定蛋白质的等电点对于了解目的蛋白质的理化性质和设计纯化目的蛋白的策略均有重要帮助。

目前，用于测定蛋白质的等电点的方法主要有一种：等电聚焦电泳测定蛋白质等电点。

原理

等电聚焦电泳测定蛋白质等电点的基本原理是以聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶或葡聚糖凝胶为支持物，在凝胶中加人载体两性电解质。

载体两性电解质是脂肪族多氨基和多羧基类混合物， 可以在电场中自然形成正极为酸性、负极为碱性的连续线性 pH 梯度。

蛋白质分子在这一连续线性 pH 梯度电场中电泳时，在大于其等电点的 pH 环境中以阴离子形式向正极移动，在小于其等电点的 pH 环境中以阳离子形式向负极移动， 最后在其等电点的相应位置聚集，由此可以测定出某种蛋白质的等电点。