用棉花幼苗外植体法测定脱落酸的活性实验

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简介

脱落酸能增强果胶酶和纤维素酶的活性,引起离层产生,导致脱落。在一定浓度范围内,脱落率与脱落酸浓度成正比,脱落时间与脱落酸浓度成反比。

操作方法

用棉花幼苗外植体法测定脱落酸的活性实验

原理

脱落酸能增强果胶酶和纤维素酶的活性,引起离层产生,导致脱落。在一定浓度范围内,脱落率与脱落酸浓度成正比,脱落时间与脱落酸浓度成反比。

材料与仪器

棉花幼苗
脱落酸溶液
手术剪刀 单面刀片 烧杯 镊子 培养皿 注射器 石英砂 蛭石 脱脂棉 琼脂

步骤

一、材料与设备

棉花幼苗

手术剪刀或单面刀片,烧杯,镊子,直径10cm 培养皿,100 M  M 3注射器,石英砂或蛭石,脱脂棉,琼脂

药品

100pp M 脱落酸溶液:20 M g(±)-脱落酸用少量乙醇溶解,用蒸馏水定容至100  ml 。

1.5%琼脂培养基:1.5份琼脂和100份蒸馏水(w/w)放入烧杯中加热。待琼脂完全溶解后,趁热倒入培养皿中,使琼脂胶厚度达5 MM 左右。

二、实验步骤

1.挑选经硫酸脱绒的饱满棉种,在28-30℃下浸 24小时,然后播在湿润的石英砂中,于25℃恒温箱中照光培养,直至长出第一片真叶。培养期间应经常浇水,以保持石英砂湿润。

2.从幼苗上取下外植体。外植体是由5 M  M 真叶叶柄,5 M  M 子叶叶柄和10 M  M 下胚轴组成。在每一切面上包少许脱脂棉。然后将下胚轴插于琼脂胶中。每皿插10个外植体。

3.配制0.05,0.5,5,10,20pp M 的脱落酸溶液。

4.将插有棉花外植体的培养皿分成六组,编号,每组用一种浓度的脱落酸处理。处理方法是用微量注射器在各叶柄的切面上加50 M  M 3脱落酸溶液。

5.处理24小时后,用镊子轻碰叶柄,看是否脱落。以后每天早晚用镊子检查一次。比较同一时间各处理的脱落率和各处理脱落率达80%所需的时间。

三、结果

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THE END
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