简介
细胞膜是由脂类双分子层镶嵌蛋白质构成的单位膜,而脂类和蛋白质又与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。凝集素是一类可逆结合特异糖基的蛋白质,具有使细胞凝集、血型鉴定、促进淋巴细胞分裂、防害抗虫等作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞外被的寡糖链相连接,起到“桥”的作用。
操作方法
细胞凝集反应与细胞膜的渗透性
材料与仪器
土豆块茎
鸭血红细胞 PBS缓冲液 土豆 氯化钠 乙醇
显微镜 天平 载玻片 滴管 离心管 烧杯 移液管 试管 试管架
步骤
一、细胞凝集反应
1. 2%鸭血红细胞悬液制备:新鲜鸭血加acd抗凝剂,生理盐水洗5次,每次2 000 r/min,离心5 min,按红细胞压积用生理盐水配成2%鸭血红细胞悬液。
2. 土豆凝集素制备:土豆2克,加10 ml PBS缓冲液,浸泡2 h。
3. 细胞凝集反应
土豆凝集素 1滴
2%鸭血红细胞液 1滴
载玻片上混匀,静置20 min,镜检
4. 对照
PBS 1滴
2%鸭血红细胞液 1滴
二、细胞膜的渗透性
1. 低渗溶液
试管一支:
鸭血红细胞液1ml
ddh2o 10ml
轻摇混匀,观察颜色变化,若有溶血,记下自加入鸭血到溶液透明澄清的时间(注意结合镜检)。
2. 等渗溶液
0.17 mol/l 氯化钠、0.17 mol/l 氯化铵、0.17 mol/l 醋酸铵、0.17 mol/l 硝酸铵、0.12 mol/l 草酸铵、0.12 mol/l 硫酸铵、0.32 mol/l 葡萄糖、0.32 mol/l 甘油、0.32 mol/l 乙醇、0.32 mol/l 丙酮等8种溶液进行同样实验,步骤同上。
暂无评论内容